Масово отглеждане на дантела обикновен
Днес съществуват редица технологии за масово развъждане на обикновена дантела. Всички технологии за развъждане на този хищник осигуряват голямо количество от този ентомофаг при сравнително ниска цена. Масовото размножаване на обикновена дантела включва следните технологични операции: получаване на храна за дантелените лайкуни (яйца на зърнени молци или други насекоми, както и изкуствени хранителни среди), инкубиране на яйца на хищници, индивидуално или групово отглеждане на дантелени дантели, задържане на възрастни насекоми, получаване на яйца, натрупване и запазване на биоматериал. Според параметрите на околната среда на вида, на всеки етап от технологията на размножаване е необходимо да се създадат определени условия на температура и влажност, както и да се осигури на ентомофага висококачествена храна. Повечето промишлени биолаборатории развъждат дантели, използвайки яйца от зърнен молец като храна за ларви (Sitotroga cerealella
Съдържание
- Развъждане на обилно обиране на яйца на зърнен молец
- Лабораторен метод за масово развъждане на обилно обиране
- Материя на маточната култура
- Инкубация на яйца
- Грижа за ларва
- Грижи за възрастни и получаване на яйца
- Съхранение на дантели
- Технология на механизирано развъждане на обикновена дантела
- Размножаване на обилно обиране на изкуствени хранителни среди
- Видове изкуствени хранителни среди и технологии за приготвянето им
- Получаване на ензимен хидролизат на казеин
- Получаване на ензимен хидролизат на соев протеин
- Получаване на смес от липиди
- Получаване на екстракт от мая
- Получаване на екстракт от пшеничен зародиш
- Подготовка на средства за култура
- Производство на капсулни черупки
- Техниката на разреждане на чистенето върху микрокапсулирана хранителна среда
Развъждане на обилно обиране на яйца на зърнен молец
Многобройни проучвания на местни и чуждестранни учени установяват, че яйцата на зърнен молец са пълен заместител на естествения фураж на ларвите на хищници. За хранене на ларвите обикновено се използват както жизнеспособни (пресни) яйца на ситрогени, така и тези, които са загубили жизнеспособността си в резултат на дълго съхраняване при ниски температури. Установено е, че хранителната им стойност не намалява дори при продължително съхранение (до три месеца). Това ви позволява да ги натрупате.
Масовото развъждане на данъците от обикновени яйца на зърнени молци се извършва както в лаборатория, така и по механизиран начин, като се използва специално промишлено оборудване.
Лабораторен метод за масово развъждане на обилно обиране
Технологията за лабораторно развъждане на дантела включва следните операции: получаване на маточна култура на резба, инкубиране на яйца, индивидуално или групово отглеждане на ларви, получаване на хищници на хищници, задържане на възрастни насекоми и съхраняване на биоматериал.
Материя на маточната култура
Лабораторното развъждане започва с придобиването на маточен материал, който може да бъде получен в други биологични лаборатории или биофабрики или събран директно в природата. Събирането на дантели се извършва най-добре в края на лятото, като се хващат възрастни насекоми на светлина, включително ултравиолетово, или чрез косене с пеперудна мрежа в полски култури, където листни въшки се намират в масата, или разклащане в мрежа от пеперуди от дървесна растителност. Преди зимуване възрастните се намират в овощни култури, в градини и паркове, по дървета и храсти, където живеят, докато не заминат за зимуване през ноември. Възрастните дантели, събрани през втората половина на октомври, вече започват да навлизат в диапаузата и променят цвета си от интензивно зелено до бледозелено, а след това с понижаване на температурата стават жълто-зелени с кафяво-червени петна по тялото.
Инкубация на яйца
За да се получат еквивалентни ларви на хищник, прясно положените (в рамките на 24 часа) яйца на лайкове се поставят в термостат, където преминават инкубационен период при температура 25 ° С и относителна влажност 80. Поради факта, че ларвите на лакуровите червеи проявяват силно изразен канибализъм, денят преди да се преродят, тоест два дни след поставянето им за инкубация, яйцата на лаценовите червеи се пакетират в специално направени клетъчни клетки за индивидуално образование на ларвите. Последният се състои от стек, изработен от дебела хартия под формата на пчелни пити, на дъното на която е мелничен газ, опънат върху дървена рамка, и капак - стъклена плоча. Когато се сглобява, всяка клетка в комбинация с дъното и капака образува изолирана индивидуална градина с размери 7 × 12–5.0 × 12.5 мм. Могат да се използват и други градини..
Приготвените яйца се пакетират чрез разпръскване, като се използва обикновено устройство за тип пипер за това, с размери две яйца на клетка. Около 800 яйца са необходими за запълване на една градина, което съответства на маса от 34,8 mg.
Грижа за ларва
През целия период на индивидуалното развитие на ларвите те се хранят три пъти. Храненето на ларвите на лазения червей се осъществява чрез разпръскване на яйцата на ситрогените, като се използва същото устройство, както по време на опаковането на яйцата на лаценовия червей. Първо сервиране на яйца зърнени молци се въвеждат едновременно с ентомофажните яйца със скорост 2 mg на клетка. След това полагането е покрито със стъкло и градината се поставя в термостат с температура 25 ° C. Второ хранене на ларви извършена при достигане на втората възраст или пет дни след първата. До този момент тяхната гласност е значително повишена, така че дозата на яйцата се увеличава до 14 mg на клетка. За разлика от първата по време на второто хранене, ларвите на хищниците се анестезират предварително с въглероден диоксид, а яйцата на ситотрога се разпръскват равномерно върху стъкло, предварително намазано с мед и покрито с градинска полагане. За да ускорите тази операция, се препоръчва да имате по две чаши за всяка градина. Това ви позволява предварително да приготвяте храна за ларви на ентомофагите и да сменяте чашата само в градините по време на хранене. Готовите чинии за храна се съхраняват в хладилник за три или повече дни..
Трета порция яйца дайте, когато ларвите достигнат третата възраст, тоест три дни след втората. Нормата на яйцата през този период се увеличава до 16 mg на клетка, или 6,4 g на градина. При хранене на ларви от лакуни за дозировки на фуражите е удобно да се използват предварително подготвени обемни мерки с капацитет, съответстващ на първото, второто, третото хранене. Три до пет дни след третото хранене, ларвите завършват храненето и опушват. Ако спазвате образователния режим от всяка градина, можете да получите 450 памучни пашкули.
Предложен е групов метод за трениране на ларви на лакуни. При ларвите от първа и втора възраст, с определена плътност на плячката и оптимална температура и влажност, както и с достатъчно храна, канибализмът на хищници може да бъде сведен до минимум. Например, при задържане на ларви на ентомофага в обикновени половинлитрови буркани от 100 индивида всеки, могат да се получат до 91,7 ларви втора инсталация. Увеличаването на плътността на дантелите води до увеличаване на канибализма, а продукцията му рязко намалява. Груповият метод за задържане на ларви от лакуни е оправдан само когато са получени ларви от втори стадий. За да се получи имаго, този метод е неприемлив, тъй като ларвите от третия стаж се хранят с какавиди.
Грижи за възрастни и получаване на яйца
Шест до седем дни след образуването на пашкули, те се прехвърлят в специални клетки за образование на възрастни насекоми. Градините са направени под формата на цилиндрични контейнери с диаметър 30 см и височина на стената 10 см. За производството им се използва винилова пластмаса, покривно желязо или друг материал. Като дъно се използва мелничен газ с размер на окото 1,5 × 1,5 мм. Горната част на градината е покрита с тъмна плътна кърпа или хартия. Мелницата на газ, хартия или плат е закрепена към градината с обръч, зареден от специален винт. Вътрешната част на стените на градината са монтирани държачи на променливи винилово-пластмасови плочи, върху които се прилагат капки за хранене на насекоми. Всяка градина може да съдържа до 200 възрастни хищници. Голямото струпване на насекоми в градините води до намаляване на плодовитостта на ентомофагите. Установено е, че с промяна на плътността на лайкове от 85 на 350 индивида на градина, плодовитостта на хищник намалява три пъти, а с оптимална плътност масовото снасяне на яйца от насекоми започва с 10-15 дни по-рано, отколкото при висока плътност.
Плодородието на дантела е силно повлияно от естеството на имаго фуража. Най-високата репродуктивна способност при насекомите се наблюдава при храненето им с въглехидратно-протеинова храна. Хищниците имат висока плодовитост при хранене на женски дантели с малтоза в комбинация с фруктоза, по-ниска плодовитост, когато глюкозата и захарозата се въвеждат в диетата, а когато захарозата се заменя със захар, плодовитостта на насекомите намалява с 1,5-2,0 пъти.
Медът и захарният сироп обикновено се използват като източник на въглехидрати за подхранване на възрастни, а автолизатът на пивната мая се използва като протеинова храна. Към горната храна е добре да добавите 2% разтвор на пчелен хляб. Добавянето дори на малко количество пчелен хляб към диетата с насекоми увеличава живота им. При хранене на една въглехидратна или протеинова храна биологичните параметри на ентомофага се намаляват.
Техниката на хранене на насекомите е, че медът или автолизатът на дрождите се прилагат върху вътрешните стени на раздели под формата на редове капки, които се редуват. През първите четири до пет дни насекомите се хранят само с мед или захарен сироп, а след това с автолизат от мед и бирена мая, всеки от които се прилага отделно. Разстоянието между капките мед трябва да бъде около 3 см. Автолизатът се прилага върху раздели на всеки два реда мед. Броят на капки мед подред по цялата височина на раздела 10-12, мая - 5-6.
При смяна на фуража, за да се предотврати разпространението на насекоми, те се анестезират. За да направите това, използвайте специално устройство с изсмукване на въздух (на долната страна на масата е инсталиран редовен вентилатор за домакинство с отвор, изрязан според диаметъра на градината). Когато вентилаторът е включен, насекомите се притискат към мрежестото дъно на клетката с въздушен поток. Понастоящем горната тъкан или хартия с яйца, положени върху тях, се отстраняват и раздели се сменят.
Яйцата се събират чрез рязане на стъблата с предпазна бръснач. Трябва обаче да се има предвид, че в този случай около 20 от тях умират от механични повреди. По-удобен метод, основан на разтварянето на стеблата на яйцата в 0,8 разтвор на натриев хипохлорит. За да направите това, хартиеният или тъканският връх на клетката с яйцата на дантелите се потапя за 4 секунди във воден разтвор на натриев хипохлорит, предварително нагрят до 24 ° С. След това хартията или тъканта се държат във въздуха за 16 секунди и яйцата се измиват със струя вода на гъсто сито, изсушават се и се използват по предназначение.
Съхранение на дантели
За успешното използване на дантела е важно да се натрупа достатъчен запас от хищник, така че, ако е необходимо, да се освободи ентомофаг върху големи площи. За целта е разработена техника за консервация на дантели в различни фази от нейното развитие..
Съхранение на яйца. Оптималните условия за съхранение на яйцата за лакиране са температура 5 ° C и относителна влажност 80-90. Само прясно снасяни яйца са подходящи за консервиране. В зависимост от фазата на ембрионалното развитие степента на оцеляване на яйцата по време на съхранение варира. Най-приемливото съхранение на яйца, когато периодът на съхранение е не повече от 20 дни. През този период 76-96 ембриони остават жизнеспособни. По-дългата консервация няма практическа стойност, тъй като по-голямата част от яйцата през това време губят жизнеспособността си. И така, докато поддържат яйцата в рамките на 30-35 дни, 36-50 зародиша умират.
Съхранение на ларви. Подобно на яйцата, ларвите на лакуните са неподходящи за дългосрочно опазване. При ниски температури те се съхраняват в продължение на 30-40 дни. Ларвите от първа възраст са по-подходящи за това. Ларвите от втора и трета възраст могат да се съхраняват до 20 дни. При по-дълго съхранение тяхната жизнеспособност намалява.
Съхранение на пашкули. Запазени са само онези пашкули, в които се образуват какавиди, тоест седем дни след образуването на пашкула. Пашкули с какавиди не са се образували, дори по време на 10-дневно съхранение умират (30-36). Какавидите се съхраняват при температура 2 ° C и относителна влажност 75. Най-голямо влияние върху оцеляването им оказва продължителността на съхранение, която не трябва да надвишава 10 дни. По-дългият престой при ниски температури води до значителна смърт на насекоми. Така че, ако се съхранява 20 дни, жизнеспособността се запазва само при 41-52 какавиди.
Съхранение на възрастни репродуктивни индивиди. Най-добрите условия за опазване на възрастните активни насекоми е температура 4 ° C и относителна влажност на въздуха 70-90. Възрастните дантели се съхраняват в кръгли сита или в стъклени половинлитрови или литрови буркани. За да се увеличи общата използваема площ, в банките се поставя кръстосан лист от картон, който разделя банката на четири сектора.
За съхранение се използват млади насекоми (мъжки и женски). До 200 насекоми се поставят в половин литров буркан, в банки с по-голям капацитет броят им се увеличава в съответствие с обема. Преди да започне процесът на съхранение, насекомите се хранят с мед в продължение на пет до седем дни. По време на периода на съхранение на ентомофагите периодично (веднъж на всеки пет дни) те се хранят с мед или захарен сироп. Насекомите, предназначени за съхранение, не дават автолизат на дрождите. Такива условия позволяват да се осигури дългосрочно запазване на ентомофагите (степен на оцеляване 85-90) със задоволителна репродуктивна способност. Имайте предвид, че дългосрочното съхранение на активни жени намалява техния живот.
Съхранение на очи за възрастни дантели. Обичайната лайкове в жизнения цикъл има въображаема диапауза, тази функция се използва при съхранение на насекоми. Условията са предварително създадени за тях (кратък ден с продължителност 10-12 часа в продължение на 22-34 дни), необходими за предизвикване на диапауза в дантелата. За да се ускори процеса на преминаване на насекомите в състояние на диапауза, протеиновите фуражи се изключват от диетата им през този период и се хранят само със захарен сироп. По време на диапаузата дантелите не снасят яйца. Външно от активните се различават по цвета на тялото..
Разнообразие от дантели се съхранява при температура 5 ° C и относителна влажност 70. По време на периода на съхранение насекомите постоянно се хранят със смес от захарен сироп или мед от автолизата на пивната мая. Това е необходимо за увеличаване на плодовитостта на хищниците..
Насекомите от обхват са по-подходящи за съхранение от активните индивиди. Дори 150 дни след съхраняването над 70 лайкове оцеляват и до 93 жизнеспособни ларви се регенерират от яйцата, които са положили. Насекомите се активират отново при лек период от 16 часа и температура на въздуха над 5 ° C.
Технология на механизирано развъждане на обикновена дантела
Въз основа на многогодишни лабораторни изследвания, служители на Узбекския научно-изследователски институт за растителна защита (Ташкент) са разработили набор от оборудване (линия) за масово развъждане на дантела. Комплектът от оборудване се състои от стайна термостатна апаратура с контролиран микроклимат и три броя оборудване, предназначено за различни технологични операции при развъждане на чистене.
Назначаване, технически данни и принцип на работа на оборудването за масово отглеждане на обикновена дантела
Механизираната линия е предназначена за масово развъждане на обикновена дантела. Монтира се в лабораторни помещения, в които 220/380 V, 50 Hz променлив ток мрежи, водоснабдяване, вентилация, канализация.
Производителността на тази механизирана линия е 1,0 милиона яйца за отслабване на ден. Основните компоненти на механизираната линия за отглеждане на обилно обиране и основните функционални показатели и предназначението на отделните й части са дадени в таблица 1 и 2.
Таблица 1
Основните компоненти на линията на масовото размножаване на чистенето
Наименование на оборудването | Броят на инсталациите, които са включени в линията |
Инсталация за дозировка на фуражните ларви при лакирането | 1 |
Инсталация за изваждане на пашкули от лайкове | 1 |
Стелажи за поставяне на хексели с ларви на лакуна смокиня смокиня 2 | 4 |
Стая с термостат | 1 |
Таблица 2
Основните функционални показатели предназначение на отделните части на оборудването за масово развъждане на дантела
Наименование на оборудването | Функционално предназначение | Основни индикатори |
Растения за дозиране на фуражи | Предназначена е за дозиране на фураж и яйца за лакиране в хекселни клетки | Производителност на растението - 1 хексел за 5 минути |
Инсталации за изваждане на пашкули от лайкове | Предназначен е за премахване на макаронени пашкули от хекселни клетки | Производителност - 1 хексел за 10 минути |
Климатична стая | Проектиран да побира хексели и дантели за възрастни в производствения процес | Броят на хекселите, които се поставят на рафтовете - 100 бр. |
Единица за дозиране на храна за ларви на лакуна Той е предназначен за дозиране на подаване в хекселни клетки, представлява рамка с инсталиран перфориран захранващ резервоар.
За да се развият приблизително едновременно всички ларви на лазени червеи, за инкубиране се вземат само прясно снасяни яйца. Яйцата на хищник от една колекция се смесват с яйца на ситотрог в съотношение 5 mg ситотрог на яйце от лайконг и при изчисляване на 17-20 g яйца на ситотрог на хексел.
Дозиращата табела гарантира, че 10 mg храна се подава към всяка хекселова клетка. Повторната превръзка от 10 mg във всяка клетка се извършва след шест до осем дни в единица за дозиране на фураж. След 12-15 дни, ларвите, след като завършат развитието си, се пукаят в клетките на хексел. Два до три дни след кученето на ларвите или 15-17 дни след снасянето на яйцата, хекселът се прехвърля в растение за отстраняване и събиране на пашкули.
Инсталация за изваждане и събиране на пашкули от лайкове предназначен за премахване и събиране на пашкули от дантела от хексел Фиг. 1. Агрегатът е оборудван с електрическо задвижване с конвейерно подаване на хексели. Налягането на пневматичната система за издухване на пашкули в рамките на 3-4 атм. поддържа се от компресор. В долната част на транспортьора има кокосов тиган с газова решетка. Събраните пашкули се поставят в клетки за заминаване на възрастни и по-нататъшното им поддържане.
Климатична стая Предназначена е за размножаване на възрастни и ларви от лакуни при оптимални хигротермални условия. Той трябва да поддържа следните параметри: температура на въздуха 26 ± 1 ° C, относителна влажност 70 ± 5, фотопериод 10-18 часа.
Технологичният процес на производство на дантела. Технологията на механизирано развъждане на дантела се състои от следните основни производствени процеси:
- Събиране на естествени популации на ентомофаги.
- Подготовка на фуражите.
- Съдържанието на възрастни насекоми в клетки или банки.
- Събиране на яйца за лакиране.
- Инкубация на яйчени люпила.
- Отделни растящи ларви в хексели.
- Премахване и събиране на пашкули от дантела.
- Поставяне на пашкули в буркани.
- Възпроизвеждане на биоматериал.
- Съхранение на биоматериал за употреба.
Възрастните на лайкове съдържат 150 броя в стъклени трилитрови буркани. или в специални клетки за 3,5 хиляди бр. Банките или клетките се поставят на стелажи в термостатична стая с регулируем фотопериод или в климатичен шкаф. Оптималната температура на дантела е 24-26 ° C, относителната влажност е 65-70. Ентомофагът имаго се храни ежедневно с мед и автолизат на пивни дрожди. В бурканите се поставят ивици тъмен памук, върху които женските дантели снасят яйцата си. Ако дантелите се държат в банките всеки друг ден, ивици с яйца, положени върху тях, дантели се изваждат от консервата и се слагат чисти ивици, яйцата за дантели се режат внимателно с ножици от част от лентите, други яйца представляват търговски продукти. Нарязаните отворени яйца за отслабване се смесват с яйца на ситотрог в съотношение 5 mg яйца на ситотрог на едно яйце от яйца и на базата на 17-20 g яйца на ситотрог, смесени с яйца за лайкове в посоченото съотношение, се изсипват върху дозиращата плоча на дозиращото устройство за фураж. След като напълнете дозата яйца със захранването в специално устройство - хексел, той се затваря с капак. Шекселите се поставят на специални стелажи (Фиг. 2) в термостатично помещение с регулируем фотопериод при температура 24-26 ° C, където те съдържат в продължение на 15-17 дни.
Седем дни след снасянето се извършва второ захранване на ларвите на ластовица с доза от 17-20 g яйца на ситотрог на хексел. След 15-17 дни капаците на хекселите се отварят и пашкулът на лазения червей се събира на инсталацията за отстраняване на пашкули (Фиг. 1) и 150 бр. подредени в банки или клетки. Личинките, които не са имали време да пукнат, се поставят в епруветки от 1 екземпляр. и хранете ситотрогите с яйца, докато се пукнат. След началото на заминаването на имаго, процесът на възпроизвеждане се повтаря. Веднъж на всеки четири до пет дни банките от възрастните на лайкове се заменят с чисти, тъй като ларвите се регенерират от яйца, положени по стените на консервите, проявяват канибализъм и ядат прясно снасяни яйца от ентомофага.
Размножаване на обилно обиране на изкуствени хранителни среди
Най-обещаващите хранителни субстрати за обикновените ларви на ларви са микрокапсулирани хранителни среди, които по отношение на физическите свойства и биохимичния състав имитират естествената храна на хищник.
Разработена е формулировката на няколко течни изкуствени хранителни среди за обучение на ларви от лакуни и инсталация за опаковане на хранителни среди в микрокапсули. Използването на микрокапсулирана среда за изкуствена култура позволява да се намалят разходите за яйца на зърнени молци с 90-92 и значително да се намалят общите разходи за размножаване на чистене.
Видове изкуствени хранителни среди и технологии за приготвянето им
Известно е, че обикновената дантела е най-ефективно използвана при биологичния контрол на листните въшки във фазата на ларвите от втори стадий. За хранене на ларвите се използват няколко вида културни среди (Таблица. 3).
Таблица 3
Формулирането на изкуствени хранителни среди за ларви на лазене обикновени
компонент | Съдържанието на компонента в средата (g / 120 ml среда) | |||
аз | II | III | IV | |
пептон | 4.80 | - | - | - |
Казеинов ензимен хидролизат | - | 2.84 | 3.72 | 5.00 |
Соев протеин ензимен хидролизат | - | - | - | 5.00 |
Екстракт от дрожди | 4.24 | 1.88 | 2.68 | - |
Екстракт от пшеничен зародиш | 4.32 | 5.68 | 6.96 | - |
Захароза или захарна храна | 6.00 | 14,00 | 6.00 | 15,00 |
Смес от липиди | 0.12 | 0.20 | 0.12 | 0.55 |
витамини | ||||
Холин хлорид | 0050 | 0050 | 0050 | 0050 |
Витамин С | 0100 | 0100 | 0100 | 0100 |
Витамин В12 | 0.000004 | 0.000004 | 0.000004 | 0.000004 |
Никотинова киселина | - | - | - | 0.0020 |
Калциев пантетонат | - | - | - | 0.0020 |
Витамин В1 | - | - | - | 0,00050 |
Витамин В6 | - | - | - | 0,00050 |
Витамин В2 | - | - | - | 0.0010 |
Фолиева киселина | - | - | - | 0,00050 |
биотин | - | - | - | 0,00004 |
инозитол | - | - | - | 0020 |
Минерални соли | ||||
Монозаместен натриев фосфат | 0.0800 | 0.0800 | 0.0800 | 0.0800 |
Магнезиев сулфат | - | - | - | 0050 |
Железен сулфат | - | - | - | 0005 |
Разместен калиев фосфат | - | - | - | 0160 |
Багрило неутрално червено | 0024 | 0024 | 0024 | 0024 |
Емулгатор twin-80 | 0.120 | 0.120 | 0.120 | 0.120 |
Дестилирана вода | до 120 мл | до 120 мл | до 120 мл | до 120 мл |
Хранителните среди (I-III) се препоръчват за хранене на ларви от момента на прераждането до първата мол и в началото на втората възраст. Тези среди са напълно взаимозаменяеми и се използват в зависимост от наличието на определени компоненти в биологичната лаборатория. Сряда ІV се препоръчва за обучението на ларви от лакуни от втори и трети век по време на възпроизвеждането на лабораторни популации с лайкове.
Получаване на ензимен хидролизат на казеин
Приготвяне на 2-ия казеинов разтвор. Казеинът (30 g) се разбърква с 1500 ml 0,01 n KOH разтвор при 40 ° С в продължение на три часа. Стойността на pH се следи на всеки 15 минути и се поддържа в рамките на pH 8 чрез добавяне на капки 0,1 n KOH. Полученият разтвор е бистра, силно опалесцираща течност..
Хидролизат на панкреаса. Панкреатинумът (300 mg) се смесва с 5 ml 2 казеинов разтвор в 0,01 n KOH при 40 ° С за 40 минути. Полученият разтвор за ензимен препарат се добавя към по-голямата част от алкалния разтвор на казеин на три равни части на всеки 3 часа. След добавяне на последната част от ензима, разтворът се разбърква още 15 часа при 40 ° С и pH 8.
Пепсин лечение на панкреатичен хидролизат. В края на хидролизата на панкреаса разтворът се подкислява с 2 n сярна киселина с интензивно разбъркване до рН 2. Пепсинът (300 mg) се разтваря при разбъркване в 5 ml вода и се въвежда в подкиселения хидролизат на три равни порции на всеки 3 часа. След добавяне на последната порция от ензима, реакционната смес се разбърква още 15 часа при 40 ° С и рН 2.
В края на хидролизата към нея се прибавя на капки наситен воден разтвор на бариев хидроксид до рН 7. Образуваната утайка от бариев сулфат се отделя чрез центрофугиране (5700 g, 5 ° С, 10 минути) и се отстранява. Супернатантът се концентрира до обем от 150 ml, концентрираният хидролизат се лиофилизира. Лиофилизираният ензимен казеинов хидролизат е бял аморфен прах, лесно разтворим във вода. Добив 28.5 g (95).
Получаване на ензимен хидролизат на соев протеин
Изолация на соев протеин. Соевите семена (375 g) се стриват в електрическа мелница, смесват се с 1 L петролен етер, разбъркват се в продължение на един час при 20 ° С, утайката се разделя чрез центрофугиране (5700 g, 10 ° C, 5 минути). Обезмасляването на соевото брашно се повтаря още два пъти, след което се суши на въздух. Добивът на обезмаслено брашно е 300 g (80). Полученото соево брашно се смесва интензивно с 3 л дестилирана вода за час при 20 ° С..
Частта, която не се разтваря, се отделя чрез центрофугиране (5700 g, 10 ° С, 30 минути) и се утаява, супернатантата се подкислява на капки с 0,1 N солна киселина до рН 4,5 с разбъркване и се оставя 1 час при 20 ° С. Утайката се отделя чрез центрофугиране (5700 g, 10 ° С, 10 минути), промива се със студена вода (3 × 100 ml), супернатантата и промивките се изхвърлят. Утайката се смесва с 0,5 1 вода, на капки към сместа се прибавя 0,1 n KOH, избистря се чрез центрофугиране (5700 g, 10 ° С, 30 минути). Супернатантът се подкислява с 0,1 N солна киселина до рН 4,5, сместа се разбърква в продължение на един час при 20 ° С. Утаеният протеин се отделя чрез центрофугиране (5700 g, 10 ° С, 30 минути), промива се със студена вода (3 × 100 ml) и се лиофилизира. Добивът на лиофилизиран протеин е 30 g (10).
Приготвяне на 2-ри разтвор на соев протеин. Лиофилизираният протеин (30 g) се разбърква при 40 ° С с 1500 ml разтвор 0,01 N KOH в продължение на 3 часа. РН на разтвора се поддържа чрез добавяне на капки 0,1 N KOH към осем. След това разтворът се загрява на водна баня (90-95 ° С, 30 минути) и се охлажда до стайна температура.
Обработка на получения разтвор с панкреатин. Панкреатинът (1 g) се разтваря в 5 ml 2 соев протеинов разтвор при разбъркване в продължение на 40 минути. Полученият разтвор се добавя на три равни порции към основния обем на соевия протеинов разтвор на всеки 3 часа. Продължителността на ензимната хидролиза е 48 часа (40 ° С, интензивно разбъркване).
Пепсин лечение на панкреатичен хидролизат. В края на панкреасната хидролиза, 2N разтвор на сярна киселина, рН на хидролизата се регулира на две. След това 300 mg пепсин се разтварят в 5 ml вода и се добавят на три равни части към соевия протеинов хидролизат на всеки 3 часа. Продължителността на хидролизата е 24 часа при рН 2, 40 ° С с интензивно разбъркване.
РН на разтвора се регулира до рН 7 чрез добавяне на наситен воден разтвор на бариев оксид хидрат. Утайката се отстранява чрез центрофугиране (5700 g, 10 ° С, 10 минути), супернатантата се лиофилизира.
Лиофилизираният ензимен хидролизат на соевия протеин е жълтеникав аморфен прах, разтворим във вода. Добив - 20 г (66).
И двата препарата от ензимни протеинови хидролизати се съхраняват в херметически затворен стъклен съд при 5 ° C за период до 12 месеца.
Получаване на смес от липиди
В минимално количество серен етер се разтваря 1 g холестерол, смесен с 5 g соево масло в 5 g слънчогледов лецитин. Серен етер се изпарява при температура на водна баня не по-висока от 40 ° С. Сместа може да се съхранява при 5 ° С в продължение на една година..
Получаване на екстракт от мая
1,8 кг биомаса от пивна мая се отделят от хранителния субстрат чрез центрофугиране (5700 g, 4 ° C, 20 минути).Saccharomyces cerevisiae,) и се измива два пъти със студена дестилирана вода. Автолизата се провежда в 2,7 л вода при 37 ° С (съотношението биомаса на дрожди и вода е 1: 1,5) в продължение на два дни. Полученият автолизат се центрофугира (5700 g, 4 ° С, 20 минути), филтрира се през бактериален филтър и се лиофилизира. Добивът на лиофилизиран екстракт е 10 тегловни% сурова мая.
Лиофилизиран изсушен екстракт от мая е кафяв хигроскопичен аморфен прах, разтворим във вода без остатък. Срок на годност при 5 ° C - най-малко 12 месеца.
Получаване на екстракт от пшеничен зародиш
330 г пшеничен зародиш се стриват в електрическа мелница, смесват се с 0,9 л петролен етер и се разбъркват в продължение на 2 часа при 20 ° С. Утайката се отделя чрез центрофугиране (5700 g, 4 ° С, 10 минути). Обезмасляването на ембрионите се повтаря още два пъти, след което те се изсушават на въздух. Добив на брашно без мазнини 100 g (30.3).
100 г обезмаслено брашно от пшеничен зародиш (съотношение брашно към вода - 1:10) се смесват с дестилирана вода и се разбъркват още 4 часа при температура 20 ° С. Утайката се отделя чрез центрофугиране (5700 4 ° С, 20 минути) и след това отново се екстрахира с вода (съотношението брашно към вода - 1: 5). Измитата вода се комбинира и лиофилизира. Добивът на лиофилизиран екстракт от пшеничен зародиш е 41 g (41).
Лиофилизиран екстракт от пшеничен зародиш е бял аморфен прах, лесно разтворим във вода. Срок на годност при 5 ° C - най-малко 12 месеца.
Подготовка на средства за култура
Сряда 1. В 60 ml дестилирана вода се разтварят 80 mg NaH2PO4 × 2H2O, 6 g захароза или хранителна захар и 4,24 g екстракт от дрожди. Сместа се държи при стайна температура в продължение на 3 часа, след което в нея се разтварят 4.32 g екстракт от пшеничен зародиш, 4.8 g пептон, 0.25 ml 20% разтвор на холин хлорид (50 mg), 1 ml разтвор на витамин В12. 0,004 mg), 100 mg витамин С, 24 mg багрило (неутрално червено), 120 mg емулгатор (tween-80) и 120 mg смес от липиди. Общият обем на хранителната среда се регулира с дестилирана вода до 120 ml.
След добавяне на всяка съставка сместа се разклаща старателно. Крайното смесване се извършва с помощта на електрически хомогенизатор (8000 об. / Мин., 2 минути). Хомогенизираната растежна среда се филтрира през стъклен филтър № 3. Готовата среда се опакова в стъклени ампули, запечата се и се съхранява при температура минус 10 ° С. Допустимият срок на годност при тези условия е не повече от 6 месеца.
Сряда II и III. Приготвя се по същия начин като среда I, но вместо пептон се добавя необходимото количество казеинов ензимен хидролизат.
Сряда IV. Пробите от минерални соли се разтварят в 25 ml разтвор на витамин В2 (1 mg): K2HP04 × ZN20 - 160 mg, MgS04 × 7H20 - 50 mg, NaH2P04 × 2H2O - 80 mg и 20 mg инозитол. След това се добавят предварително приготвени водни разтвори на витамини - 1 ml разтвор на смес от никотинова киселина и калциев пантотенат (2 mg всеки), 1 ml разтвор на смес от витамини В1 и В6 (0,5 mg всеки), 1 ml разтвор на биотин (0,04 mg ), 1 ml разтвор на витамин B12 (0,004 mg), 54 ml разтвор на фолиева киселина (0,5 mg), 0,25 ml от 20-ия разтвор на холин хлорид (50 mg) и 1 ml разтвор на FeS04 × H20 (5 mg).
В получената смес от минерали и витамини се разтварят 15 g захароза или хранителна захар, 5 g казеинов ензимен хидролизат, 5 g ензимен хидролизат на соев протеин, 100 mg витамин С и 24 mg неутрално червено багрило. След това към сместа се прибавят 120 mg Tween-80 и 550 mg смес от липиди. Общият обем се регулира с дестилирана вода до 120 ml. Сместа се разбърква, филтрира и съхранява по същия начин като предишната среда..
Хранителната среда е емулсия със специфично тегло около 1,075 g / cm3, не стратифицирана през деня при 5 ° C.
Производство на капсулни черупки
Съставът на черупката се приготвя, както следва: 59,4 парафин и 39,6 пчелен восък се разтопяват в метална купа на електрическа печка при 110-115 ° С, след това се добавя 1 олеинова киселина. Разтопената маса се филтрира през слой памучна вата, опакова се и се съхранява в метален контейнер, предпазващ от прах. Втвърденият материал на обвивката е жълта аморфна маса с температура на топене 85-90 ° С.
По време на масовото производство на обикновена дантела е препоръчително да се произвеждат хранителни среди или медийни компоненти и капсулни черупки централно в специализирано предприятие.
Техниката на разреждане на чистенето върху микрокапсулирана хранителна среда
Отглеждането на дантеленици върху микрокапсулирани хранителни среди, както и върху всяка друга форма на храна, включва следните основни процеси: съдържанието на имаго, събирането на яйца на лакута, инкубацията на яйца, приготвянето и микрокапсулирането на изкуствени хранителни среди, отглеждането на ларви, възрастни насекоми.
Съдържание на възрастни насекоми и събиране на яйца. Имаго се съдържа в цилиндрични клетки с диаметър 20 см и височина 10 см. Стените са изработени от тънка винилова пластмаса с дебелина 3-4 мм или друг подходящ материал. Дъното на клетката е марля, сгъната на два слоя, а капакът е от тъмна плътна хартия. Дъното и капакът на заряда са фиксирани с гумен пръстен.
40-тият автолизат на пивни дрожди и мед с цветен прашец се използват като фураж за възрастни, което спомага за увеличаване на плодовитостта на възрастните.
Автолизатът и медът се прилагат върху отделни парчета гума от пяна с размери 30x20x5 mm, които след това се окачват в клетки. Възрастните, получени по време на размножаването на лабораторната популация, трябва да се хранят само с мед, а след това с автолизат на мед и мая, през първите четири до пет дни след прераждането.
Около 100 чифта насекоми се държат в една клетка. Плодовитостта на една женска с такова хранене и плътност е средно 300 яйца на период на снасяне на яйца (20-25 дни). Храненето на възрастни и събирането на яйца се извършват по общоприети методи поне веднъж на ден. Клетките с възрастни насекоми съдържат при 20-25 ° C и 70-80 относителна влажност в специално помещение или кутия.
Инкубация на яйца. Яйцата на дантелите, получени за един ден, се разпръскват в чаши на Петри и се поставят в термостат, в който автоматично се поддържа постоянна температура от 25 ± 1,5 ° С и относителна влажност 75-80. В термостата допълнително са инсталирани флуоресцентни лампи и устройства за наблюдение на дневната светлина. Такъв термостат се използва и за образование на ларви и запазване на имаго..
Едновременно с инкубацията на яйцата те започват да подготвят хранителни среди и да ги капсулират..
Приготвяне и микрокапсулиране на хранителни среди. Технологията на подготовка на културните среди е дадена по-горе. Микрокапсулацията се извършва на специална инсталация, схемата на която е представена на фиг. 3.
Принципът на работа на инсталацията е следният: охладената хранителна среда от резервоара 1 влиза под налягане във вътрешния канал на капсулиращото устройство 2. Едновременно от резервоара 3, разтопеният корпусен материал навлиза в пролуката между вътрешния и външния канал на блока 2. Необходимите температурни условия се поддържат в резервоари 1 и 3, в захранващите системи за черупката 4 и хранителната среда 5 чрез ултратермостати 6 и 7. Необходимото налягане на средата и черупката се създава с помощта на редуктор на налягането 8 и цилиндър със сгъстен азот 9. В капсулиращия блок 2 се постига ефектът от образуването на две течности струя под въздействието на повърхностното напрежение и температурните спадове се разпада на отделни капсули с хранителна среда. Капсулите се втвърдяват при падане и се събират в контейнер 10.
Оптималният режим на работа на инсталацията: налягането в системата е 4,5 kg / cm2, температурата на средата е 8-12 ° C, а температурата на обвивката е 85-90 ° C. Получените микрокапсули са сферични по форма, с диаметър 400-600 микрона, дебелина на обвивката 15-20 микрона. Съдържанието на хранителната среда в микрокапсулите е най-малко 75-80 от общата маса. Работата по инсталацията с микрокапсулация на хранителни среди се извършва в съответствие с инструкциите за неговото използване.
Микрокапсулите са фиксирани върху стъклени плочи с лепило, което е 5-ти воден разтвор на поливинилов алкохол с добавяне на сребърен нитрат като антисептик.
Пригответе лепило, както следва: 50 g прах от поливинил алкохол се разтваря в стъклена колба със 700 ml дестилирана вода (температура на водна баня 70-80 ° C). Приготвеният разтвор на поливинилов алкохол се охлажда до стайна температура и в него се добавят 2 мл предварително приготвен 0,05 разтвор на сребърен нитрат. След това общият обем се регулира на 1000 ml. Лепилото може да се съхранява в запечатан контейнер при температура 3-7 ° C в продължение на два месеца. Стъклените плочи с микрокапсули, залепени в един слой и поставени в ексикатори, могат да се съхраняват в хладилник за 10-12 дни при температура 3-7 ° C и относителна влажност 70-90 (в ексикатори).
Списъкът на материалите, необходими за приготвяне на хранителни среди и обвивки с капсули:
- пептон.
- Казеинов ензимен хидролизат.
- Соев протеин ензимен хидролизат.
- Екстракт от пшеничен зародиш.
- Екстракт от дрожди.
- захароза.
- Хидратирано пресовано соево масло.
- Слънчогледов лецитин.
- холестерол.
- Холин хлорид.
- Аскорбинова киселина.
- Цианокобаламин (B12).
- Никотинова киселина.
- Калциев пантотенат.
- Тиамин хлорид.
- Пиридоксин хлорид (В6).
- Рибофлавин (B2).
- Фолиева киселина.
- биотин.
- инозитол.
- Натриев фосфат Монозаместен.
- Калиев фосфат Заместен.
- Магнезиев сулфат.
- Окислен железен сулфат.
- Багрило неутрално червено.
- Близнак 80.
- Парафинов восък.
- пчелен восък.
- Олеинова киселина.
- Поливинилов алкохол.
- Р-хидроксибензоена киселина метилов естер.
Грижа за ларва. Излюпването и развитието на ларвите се извършва в специализирани клетки, които се състоят от две плочи с размер 18-24 см и с хартиена клетка между тях.
Хартиените раздели се дезинфекцират предварително чрез потапяне в алкохолен разтвор на метабен (метил параоксибензоена киселина) и сорбинова киселина (1 g метабен и 2 g сорбинова киселина се разтварят в 1 литър етилов алкохол). Разтворът се приготвя предварително и се съхранява в хладилник в чиния със смляна запушалка. След обработката раздели се сушат няколко часа на въздух.
След тридневно държане в термостат, яйцата за лакиране равномерно се разпръскват по клетките на разделите със скорост едно или две яйца на клетка. Връзките се поставят обратно в термостата, където се поддържа 16-часова дневна светлина. След като започва излюпването на ларвите, горната плоча на клетката се заменя с плоча с изкуствена капсулирана хранителна среда. За да образовате ларвите от момента на прераждането до първата мол, достатъчно е веднъж (два до три дни след прераждането) да смените чинията с храна. Добивът на ларви от втори инстантор, използвани за масово производство в оранжерия, е 60-70.
Установено е, че за да се получат пълноценни възрастни насекоми и да се увеличи добива им, е необходимо да се хранят ларви от първа възраст с яйца на зърнен молец, а след това ларви от втори и трети век, за да се култивират върху изкуствена микрокапсулирана хранителна среда IV, която най-много задоволява нуждите от хранене на ларвите от тези векове. Плаките с капсулирана храна се сменят по същия начин, както за първата възраст, веднъж на всеки два до три дни. Консумацията на яйца от зърнен молец с този модел на възпроизводство на популацията е само 8-10 от общото изискване за фураж. За отглеждането на 1000 ларви от първата възраст е необходимо да се изразходват около 35 г изкуствени фуражи (средна I-III), за отглеждането на ларви от втори и трети век по време на възпроизводството на популацията - 60-70 g (средна IV).
Вземане на възрастни насекоми. Хартиените раздели с пашкули шест до седем дни след кученето на ларвите се прехвърлят в клетки за възрастни. Съживяването на възрастните насекоми става на осмия до деветия ден. Добивът на нормално формирани възрастни достига 70. Насекомите, които летят, се хранят, както е показано по-горе. Полагането на яйца обикновено започва шест до осем дни след прераждането на имаго..